細胞名稱：

SK-NEP-1 人腎母細胞瘤細胞

半貼壁，不規則型細胞 

編號：

352207 產品形式：

2mL 凍存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ；

安全等級：

一級，安全柜或超凈臺操作

收貨須知：收貨當天發現異常，請在 24 小時內及時聯系客服，逾期視為收貨良好；凍存管形式，收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若 長時間不使用，應過夜轉移至液氮保藏；T25 形式，收貨后先培養瓶原裝置于培養箱靜養 4h，然后再對細胞進行常規操作。復蘇時每 管一次用完不得留存，復蘇后傳一代，即可正常使用。請嚴格按照本說明操作，否則造成細胞失活等情形，不予提供補發服務。

培養條件：

37℃，5%CO2，CM24-1 培養液。CM5-1 培養液：85%McCoy’s 5a+15%FBS。McCoy’s 5a：MC’5A 培養基，含谷氨酰胺。

復蘇步驟：

①新制 100mm 平皿 1 個，含 12mL 上述培養液；②凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待*溶解后盡快移入 安全柜復蘇；③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；④放入（37℃，5%CO2）培養箱中，過夜換液，3-5 天長滿。

傳代/凍存：

將舊培養液吸除，PBS 清洗兩遍后，無需使用胰酶消化，直接加入 12mL（/100mm 皿）培養液，用吸管吹打細胞至*脫 落，輕輕吹打均勻，可分 3~6 皿培養；凍存則將細胞轉移至離心管中，(110g，3min)離心，離心完成后用 6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO） 重懸細胞，吹打均勻，分為 6 支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。 

復蘇質量記錄：

根據復蘇要求，對以上細胞株進行復蘇，記錄結果如下： 

項目 質量標準 復蘇記錄

復活性： 12h 貼壁，86h 長滿 80% 過夜 18h 后觀察貼壁，96h 密度達 80% 細胞形態： 半貼壁，不規則型細胞 CM24-1 培養液中，半貼壁，不規則型，有圓形、短梭性 附圖： 結論： 復活性好，且細胞形態無異常，合格