細胞β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量檢測試劑盒

產品說明書（中文版）

主要用途

   細胞β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物PNP-NAG受到β氨基己糖苷酶催化水解后，在堿性環境下，呈現黃色，即采用比色法來測定樣品中酶活性的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體細胞裂解懸液樣品中β氨基己糖苷酶的活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。

技術背景

β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase；EC3.2.1.52）.又稱為N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl--β-D-Glucosaminidase；NAGase）屬于含有20個糖苷水解酶（glycoside hydrolase）家族，也是肽聚糖水解酶，為溶酶體細胞器中的酶之一。其功能在于水解N-乙酰-β-D-氨基己糖苷中的末端N-乙酰-β-D-氨基己糖殘基（N-acetyl-D-hexosamine   residues），參與細胞內糖蛋白和糖脂的分解代謝，包括蛋白和中性糖脂中的寡糖、粘多糖等水解。具有宿主抗感染防御作用。β氨基己糖苷酶為同源二聚體結構，有α和β兩個亞體構成：HEXA和HEXB。人體缺乏HEXA或HEXB，將導致神經退行性相關的疾病，例如家族黑蒙性*?。?/span>Tay-Sachs?。┖?/span>神經節苷脂貯積病  （Sandhoff 病）。 基于底物4-硝基苯基 N-乙酰-β-D-葡萄糖胺（4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide；PNP-NAG），在β氨基己糖苷酶的作用下，水解釋放出硝基苯酚（p-nitrophenol）和N-乙酰-β-D-葡萄糖胺（N-acetyl-β-D-glucosamine；NAG），在堿性環境下，呈現出黃色，在分光光度儀下，產生吸光峰值變化（405nm 波長），來定量分析β氨基己糖苷酶的活性。其反應系統為：

產品內容

   緩沖液（Reagent A）         毫升

   反應液（Reagent B）         毫升

   堿性液（Reagent C）         毫升

   陰性液（Reagent D）             微升

   清理液（Reagent E）         毫升

   裂解液（Reagent F）         毫升

產品說明書           1份

保存方式

保存   反應液（Reagent B）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

細胞刮脫棒：用于細胞脫離

（微型）臺式離心機：用于樣品操作

比色皿或96孔板：用于比色分析的容器

分光光度儀或酶標儀：用于比色分析